正交设计;人参皂苷;提取工艺
人参为舒脉宁注射液中的贵重药,人参皂苷提取量直接影响注射液的疗效。因此为制备舒脉宁注射液而提取人参皂苷,参考有关资料,用正交设计法研究其最好提取工艺。
1 实验材料
1.1 人参 符合《中国药典》(1995年版一部有关规定)。
1.2 人参皂苷Rb1 化学对照品,中国药品生物制品检定所提供,批号703-8802。
1.3 高效液相色谱仪 HP8810美国惠普公司。
2 正交设计
2.1 原因水平的确定 依据人参皂苷的性质,确定用乙醇回流法提取,自然pH值条件下,本研究重点考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数等4个原因,每一个原因3个水平,原因水平表见表1。表1 人参皂苷提取原因-水平表
2.2 正交表的选择 本研究选择L9(34)表,正交设计及统计剖析见表2。
3 实验办法
3.1 样品液的提取 取人参(粗粉)20g,加表2中规定量的规定浓度的乙醇,回流规定的次数和时间,放置24h以上,滤过,收购乙醇,加水溶解并稀释至100ml,115℃灭菌30min,静置3天以上,滤过,备用。
3.2 含量测定 参照《中国药典》2000版(一部)新增与修订内容汇编(1999年8月)“人参”项下办法进行。精密样品液1ml,置50ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。分别取对照品溶液与供试品溶液20μl,注入高效液相色谱仪,测定,计算,即得。
4 结果
测定结果见表2。 表2 提取工艺正交表及统计剖析表
5 结果剖析
实验结果表明,影响人参皂苷提取的原因大小顺序为B>C>A>D,即乙醇浓度为非常重要的原因,溶媒用量、提取次数及提取时间影响不大。各原因最好水平为A2B1C1D3。
6 结论
最好提取工艺:取人参粗粉,加10倍量75%乙醇,回流提取5次,每次30min。
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